丙酮酸激酶（PK）測(cè)試盒的操作過程

(測(cè)血清、血漿、組織)

一、測(cè)定原理：

丙酮酸激酶（pyruvate kinase. PK）在 ADP 存在下可

催化 PEP 產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸再由 LDH 將其轉(zhuǎn)變?yōu)槿?/span>

酸，同時(shí)將 NADH 變?yōu)?/font> NAD。

二、試劑組成與配制：（50 管/48 樣）

試劑一：液體 60mL×1 瓶，4℃保存。

試劑二：粉劑×2 支，-20℃保存，每支用時(shí)加雙蒸水

1.4mL，用不完放-20℃以下保存 3～7 天。(如

果你的樣本量少，可以將配好的 1.4mL 再分

成 2～3 管放-20℃以下保存，每次取一管用，

以免反復(fù)凍融)

試劑三：液體×4 支，4℃保存，不可冷凍，用不完的仍

放 4～8℃保存。

試劑四：粉劑×4 支，-20℃保存，用時(shí)每支加雙蒸水

320µL，用不完放-20℃以下保存。

試劑五：粉劑×4 支，-20℃保存，用時(shí)每支加雙蒸水

650µL，用不完放-20℃以下保存。

三、操作過程:

1、樣本前處理：

①、血清（漿）樣本：直接檢測(cè)。

②、組織樣本：準(zhǔn)確稱取組織重量按重量（g）

:體積（mL）

=1:9 的比例，加入 9 倍體積的生理鹽水，冰

水浴條件下機(jī)械勻漿，制成 10%勻漿，2500

轉(zhuǎn)/分，離心 10 分鐘，取上清再用生理鹽水

稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清待測(cè)（請(qǐng)做 1～2

個(gè)濃度的預(yù)試驗(yàn)）。（取得的上清液需測(cè)蛋白

濃度，蛋白定量試劑盒本所有售）

2、操作表：

 丙酮酸激酶（PK）測(cè)試盒的操作過程