標(biāo)準(zhǔn)革蘭氏染色液是用于細(xì)菌學(xué)實驗以區(qū)分細(xì)菌種類的一種生化試劑。以下是對標(biāo)準(zhǔn)革蘭氏染色液的詳細(xì)介紹：

一、定義與背景

革蘭氏染色法由丹麥醫(yī)生漢斯·克里斯蒂安·革蘭于1884年發(fā)明，最初用于鑒別肺炎球菌與克雷白氏肺炎菌之間的關(guān)系，后逐漸發(fā)展成為細(xì)菌學(xué)中的重要鑒別特性之一。革蘭氏染色液是該染色方法所使用的關(guān)鍵試劑。

二、組成成分

標(biāo)準(zhǔn)革蘭氏染色液通常由以下成分組成：

初染液：一般為堿性染料，如結(jié)晶紫。這一步的目的是給所有細(xì)菌染上初步的顏色，為后續(xù)步驟打下基礎(chǔ)。

媒染劑：常用的是碘液。媒染劑的作用是增加染料與細(xì)菌細(xì)胞壁之間的親和力，使染料更牢固地附著在細(xì)胞上，不易脫落。

脫色劑：一般為95%的酒精或丙酮。脫色劑的作用是根據(jù)細(xì)菌細(xì)胞壁的差異，將初染的染料從革蘭氏陰性菌中脫去，而革蘭氏陽性菌則由于細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)緊密，染料不易被脫去。

復(fù)染液：常用的有沙黃等紅色染料。復(fù)染的目的是使被脫色的革蘭氏陰性菌染上新的顏色（如紅色），而革蘭氏陽性菌則保持原有的顏色（紫色或藍(lán)色），從而實現(xiàn)對細(xì)菌的區(qū)分。

三、染色原理

革蘭氏染色的原理基于細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的差異。革蘭氏陽性菌的細(xì)胞壁較厚，由多層肽聚糖組成，且交聯(lián)致密，不含類脂。當(dāng)用結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。在乙醇或丙酮脫色處理時，由于其細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)緊密，復(fù)合物不易被洗脫，因此革蘭氏陽性菌保持紫色。相反，革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁較薄，由外膜層類脂和薄層的肽聚糖組成，交聯(lián)度差。在脫色劑作用下，外膜迅速溶解，肽聚糖網(wǎng)無法阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此革蘭氏陰性菌脫色后無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染后呈紅色。

四、染色步驟

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個步驟：

初染：使用結(jié)晶紫染料對細(xì)菌涂片進(jìn)行初染，使細(xì)菌著色。

媒染：加入碘液作為媒染劑，與結(jié)晶紫形成不溶于水的復(fù)合物，增加染料與被染物的親和力。

脫色：使用乙醇或丙酮作為脫色劑，處理涂片。革蘭氏陽性菌因細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)緊密，復(fù)合物不易被洗脫，保持紫色；革蘭氏陰性菌則因細(xì)胞壁外膜溶解，肽聚糖網(wǎng)無法阻擋復(fù)合物溶出，脫色后無色。

復(fù)染：使用沙黃等紅色染料對脫色后的涂片進(jìn)行復(fù)染，使革蘭氏陰性菌呈紅色。